生存率とヒアルロン酸の研究: ジェントルセラム

1.0 目的:

線維芽細胞培養モデルを使用して、 Aeonia Gentle Serumがヒアルロン酸合成に及ぼす効果を評価しました。

2.0メソッド

2.1線維芽細胞の調製

線維芽細胞を、0.5 ml の線維芽細胞増殖培地 (FGM) で 24 ウェル プレートの個々のウェルに播種し、37±2 ℃、5±1% CO2 で一晩培養しました。翌日、非接着細胞を除去するために培地を吸引除去し、0.5 ml の新鮮な FGM と交換しました。細胞はコンフルエントになるまで増殖させ、培地は 48 ～ 72 時間ごとに交換しました。コンフルエントに達したら、通常の培養培地に含まれる増殖因子の影響を洗い流すために、1.5% FBS を添加した DMEM で細胞を 24 時間処理しました。この 24 時間の洗浄期間の後、1.5% FBS を添加した FGM に溶解した指定濃度の試験物質で細胞を処理しました。 TGF-B (50 ng/ml) はコラーゲンとエラスチンの陽性対照として使用し、100 uM DbcAMP はヒアルロン酸の陽性対照として使用しました。未処理細胞 (陰性対照) には、1.5% FBS を含む DMEM のみを与えました。細胞は 48 時間培養し、培養期間の終了時に細胞培養培地を収集し、凍結保存 (-75°C) するか、すぐに分析しました。材料は 3 回繰り返してテストしました。

2.2ヒアルロン酸アッセイ

50 ng/mlから3,200 ng/mlまでの範囲で、一連のヒアルロン酸標準物質を調製しました。次に、各標準物質およびサンプルを100 μlずつインキュベーションプレートのウェルに移しました。各ウェル（試薬ブランクウェルを除く）に検出溶液50 μlを加えた後、プレートを37±2°Cで1±0.25時間インキュベートしました。インキュベーション後、インキュベーションプレートから各サンプル/標準物質を100 μlずつELISAプレートの対応するウェルに移しました。ELISAプレートを覆い、 4°Cで30±5分間インキュベートした後、300 μlの洗浄バッファーで3回洗浄しました。最後の洗浄後、酵素溶液100 μlを各ウェルに加え、プレートを37±2°Cで30 ±5分間インキュベートしました。このインキュベーション後、ウェルを上記のように再度洗浄し、各ウェルに酵素基質溶液 100 μl を加え、プレートを室温で 30 ～ 45 分間インキュベートしました。この最終インキュベーション後、各ウェルに停止溶液 50 μl を加え、プレートリーダーを使用してプレートの吸光度を 405 nm で測定しました。

3.0結果

ヒアルロン酸研究の結果は、表 1 とグラフ 1 に示されています。これらの値は、平均濃度 (ng/ml) ± 平均の標準偏差として示されています。

4.0議論

線維芽細胞培養モデルを使用して、 Aeonia Gentle Serumがヒアルロン酸合成に及ぼす影響を評価しました。このモデルでは、この物質が線維芽細胞のヒアルロン酸生成を大幅に増加させることが観察されました。

表1. ヒアルロン酸アッセイ結果

グラフ1. ヒアルロン酸アッセイ結果

免責事項：この文書は、独立した第三者試験施設によって実施されたデラヴィーサイエンスバチルスライセート研究の要約です。ここで提供される情報は正しいと考えていますが、過去の実績は必ずしも将来の結果を示すものではありません。